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肺部曲霉菌感染主要由烟曲菌引起,烟曲菌广泛存在于自然界,曲霉孢子容易吸入人体,可引起进行气管炎或肺炎,当曲霉感染人体器官、支气管和肺组织后,容易出现炎症、糜烂甚至组织坏死,尤其是肺血管被该细菌侵袭后,容易形成栓,血管遭到破坏后患者会出现咯血等病症,早发现、早诊断是治疗该疾病的关键。下面就从实验室角度谈谈鉴定过程与临床沟通思路。1.怀疑肺部感染的患者,临床往往会送痰培养+药敏,痰找细菌及痰找真菌,微生物室拿到标本后首先通过肉眼判断标本是否合格,如果肉眼观为口水、白色泡沫痰则与临床沟通要求重新留取标本,如果为黄脓痰、血性痰等则涂片进一步判断标本是否合格。
2.镜下涂片结果分析2.1KOH压片:用10%KOH压片,观察低倍镜及高倍镜下是否有真假菌丝及真菌孢子。如下图所示:左图为显微镜高倍镜下真菌菌丝形态,结果报告描述为:可见大量透明有隔真菌菌丝,呈鹿角样,疑为曲霉,请结合培养及其他检查。曲霉的菌丝形态呈鹿角样,形态学特点明显,KOH压片能在最快的时间内给予临床病原学的初步印象,为下一步检查和诊断提供有力依据。检验科可在压片观察后联系临床医生,进一步送检血清学G试验、GM试验,以便进一步判断是否为侵袭性感染。2.2革兰染色:判断标本是否合格,是否是来自下呼吸道标本。痰标本合格的标准是白细胞25个/低倍镜视野,鳞状上皮细胞10/低倍镜视野,如下图:低倍镜可见大量白细胞,几乎不见上皮细胞,高倍镜确认几乎全部为多形核白细胞。A低倍镜(10x10)B高倍镜(10X40)
C高倍镜(10x20)D高倍镜(10x40)
上图C和D均可看出革兰染色阳性的有隔菌丝,呈鹿角样,报告会再次提示临床可能为曲霉感染。
3培养结果:看是否有真菌菌落形成及进一步通过产孢形态判断是何种曲霉,如下图,血平板生长为烟雾状青绿色真菌菌落,乳酸酚棉兰染色可见分生孢子梗光滑,顶囊为烧瓶状,瓶梗紧密排列于顶囊上2/3,单层瓶梗,分生包子为圆形,光滑,为烟曲霉,报告单会备注菌计为1+~4+,1+标明仅在平板的一区生长,4+则表示布满平板生长。如为其他曲霉,则根据菌落颜色和形态等进一步鉴定,报告给临床。
4血清学检查:G试验和GM试验
G实验是指检测人体血液中真菌细胞壁成分1,3-β-D-葡聚糖(Glucan,BG)的实验,故称G实验。1,3-β-D-葡聚糖占真菌细胞壁成分50%,广泛存在于各种真菌。人体吞噬细胞吞噬真菌后能持续释放该物质,使血液中含量增高,适用于临床深部真菌(包括酵母样真菌、曲霉、镰刀菌,不包括隐球菌、接合菌)感染疾病的早期诊断;半乳甘露聚糖(GM)是曲霉菌细胞壁上的一种多聚抗原,从薄弱的菌丝顶端释放,曲霉菌感染的患者血液内存在该物质,而且常于临床症状和影像学出现异常之前数日出现,用于曲霉菌感染早期诊断的筛查指标。
检验科是医生的“眼睛”,患者的“嘴巴”,早一天找到引起感染的罪魁祸首,临床的精准治疗就能提前一天,患者的预后也许就因为我们的提早发现而有所不同,所以我们从拿到标本的那一刻开始就要与临床紧密沟通和联系,践行HEART服务理念,从实验室角度一步步为临床提供感染的证据,让治疗更有的放矢,与临床一起为患者更好的服务!
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撰稿:张梅
编辑:郭娜
审校:陈忠
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